Серед сучасних методів діагностики одним з найбільш точних та інформативних вважається мазок на ПЛР. Перевагою методу полімеразної ланцюгової реакції є можливість використання будь-якого біологічного матеріалу. Найчастіше зішкріб для лабораторного дослідження беруть із статевих органів чоловіків і жінок з метою виявлення та профілактики інфекцій, що передаються статевим шляхом.
Що являє собою даний аналіз
Метод ПЛР застосовується не тільки в медицині. Його використовують в археології, генетики, криміналістиці. Розробником цього виду діагностики є американський хімік Кері Мюлліса – лауреат Нобелівської премії. До речі, саму престижну міжнародну нагороду він отримав за відкриття методу ПЛР.
Завдяки полімеразної ланцюгової реакції у вчених з’явилася можливість визначати схожість ДНК, встановлювати батьківство і родинні зв’язки. І все ж основним призначенням мазка методом ПЛР прийнято вважати діагностику інфекційних захворювань у людини.
Полімеразна ланцюгова реакція являє собою високоточний спосіб молекулярно-генетичного дослідження, проведення якого дозволяє виявляти вірусні, генетичні та спадкові патології. Перевага даної методики полягає у можливості визначення хвороботворних агентів не тільки на гострій або хронічній стадії захворювання, але і в інкубаційний період, тобто до того, як з’являться перші симптоми патології.
Мазок на ПЛР ніколи не дає хибнопозитивної відповіді. Цим і відрізняється даний метод діагностики від інших. Якщо інфекції в організмі немає, пацієнт не отримає позитивний результат – в цьому можна не сумніватися. Сьогодні аналіз на полімеразну ланцюгову реакцію здають з метою визначити тип збудника і його кількість.
Переваги ПЛР
Жоден з методів дослідження не здатний знайти збудника безпосередньо в гені, що міститься в досліджуваних матеріалах. ПЛР – це максимально точний і достовірний аналіз на венеричні захворювання та латентні віруси в організмі. На відміну від інших способів діагностики, аналіз полімерної ланцюгової реакції має ряд переваг:
- він націлений на виявлення збудника інфекції;
- є універсальним, оскільки дозволяє виявляти відразу кілька типів інфекційних агентів;
- при цьому достатньо використання лише одного біологічного зразка пацієнта;
- володіє надчутливістю, за рахунок чого ймовірність можливих перехресних реакцій дорівнює нулю.
У порівнянні з методом бактеріологічного посіву, мазок на ПЛР вважається найбільш надійним і швидким діагностичним способом. Сама процедура лабораторної діагностики не займає більше чотирьох годин. Для отримання результатів бакпосіву потрібно не менше семи днів. Суть цього методу полягає в наступному: зразок біоматеріалу поміщають в сприятливе середовище і спостерігають за активністю збудників, якщо такі виявляються, протягом усього періоду дослідження.
Для виявлення яких інфекцій підходить ПЛР
Аналіз мазка на ПЛР здатний розкрити будь-яку кількість інфекційних збудників в організмі, включаючи «приховані» віруси, які не проявляють себе ніякої симптоматикою протягом тривалого часу. Цей діагностичний метод застосовують тоді, коли необхідно підтвердити або спростувати наявність у пацієнта:
- вірусного гепатиту;
- уреаплазмозу;
- хламідіозу статевих шляхів;
- вірусу папіломи людини;
- герпесу;
- злоякісних клітин;
- мікоплазмозу;
- вагінозу;
- мононуклеозу;
- трихомоніазу;
- ВІЛ-інфекції.
В якості досліджуваного матеріалу для аналізу на ПЛР використовують кров, слину, мокротиння, сечу. Перед процедурою взяття зіскрібка пацієнту необхідно підготуватися до нього. Про те, як підготуватися перед аналізом ПЛР-мазка, пацієнту повідомить лікар. Як правило, фахівці проводять з хворими відповідну консультацію. Наприклад, кров здають натщесерце, а безпосередньо перед соскобом шийки матки небажано проводити гігієнічні процедури.
Зразки для досліджень
Матеріалом для ПЛР-аналізу можуть бути практично будь-які біологічні рідини людини. Чужорідні ДНК хвороботворних мікроорганізмів здатні проникати в будь-яке середовище. Найчастіше в якості зразка для досліджень застосовується кров і її окремі компоненти (плазма або сироватка). У рідкої тканини можуть бути присутніми РНК вірусного гепатиту, простого герпесу, цитомегаловірусу, ВІЛ.
Широкі показання до дослідження мають біологічні рідини. До них відносяться:
- сік простати;
- сперма;
- вагінальний секрет;
- спинномозкова (ліквор);
- амніотична;
- бронхоальвеолярный лаваж;
- суглобова рідина;
- слина.
Для діагностики венеричних захворювань типу гонореї, хламідіозу, мікоплазмозу, уреаплазмозу, трихомоніазу, гарднерельозу, герпетичних форм та ін., у пацієнтів беруть епітеліальні зіскрібки зі слизових оболонок. У чоловіків беруть мазок ПЛР з уретри, а у жінок – з піхви або шийки матки.
Окрема категорія – біоптати. Найчастіше біоптати досліджують з метою визначення природи новоутворення, підтвердження його злоякісності. Біоптати шлунка і дванадцятипалої кишки потрібні для виявлення бактерії Хелікобактер пілорі і її кількісної навантаження.
Сеча як біоматеріал використовується при інфекційних ураженнях сечовидільної системи. У чоловіків мазок ПЛР нерідко замінюють дослідженням сечі, оскільки уретра у представників сильної статі є універсальним елементом сечостатевого тракту.
Для діагностики туберкульозу та обструктивних хвороб легенів досліджується мокротиння. Матеріал збирають в стерильний флакон (15-20 мл) або брати мазок із зіву. ПЛР-аналіз також використовують для виявлення ускладнених форм хламідіозу, мікоплазмозу та – при відсутності лікування та інших несприятливих факторів дані види інфекції здатні вражати респіраторну систему людини.
Як здавати на ПЛР біологічні рідини: загальні правила
Спосіб підготовки залежить від того, який саме біоматеріал необхідно здати на дослідження:
- Якщо для аналізу зразок слини, то процедуру проводять натщесерце. За кілька годин до дослідження не можна приймати лікарські препарати. Крім того, небажано пити багато рідини, тим більш гарячою, щоб не порушити природний склад мікрофлори ротової порожнини.
- Сечу для ПЛР необхідно збирати з ранку. Для цього необхідно підготувати стерильний контейнер і ретельно підмитися. Матеріал не повинен містити сторонніх домішок, тому чоловікам під час сечовипускання необхідно відтягнути крайню плоть, а жінкам – закрити піхву ватним тампоном.
- За три дні до здачі сперми чоловікові необхідно відмовитися від сексуальних контактів. У період підготовки небажано відвідувати лазню, приймати гарячу ванну, вживати алкоголь, гострі страви. Перед збором біоматеріалу не можна мочитися, тому за добу до аналізу бажано обмежити споживання рідини.
- Кров, як вже було зазначено, здавати потрібно зранку, натщесерце. За 2-3 дні до аналізу бажано відмовитися від жирної їжі, алкоголю та сильнодіючих медикаментів.
Показання для зіскрібка у жінок
При підозрі на те або інше захворювання, що передається статевим шляхом, лікар може призначити жінці мазок на ПЛР. В лабораторіях, які належать до бюджетних поліклінікам, такі аналізи зазвичай не роблять. Перш ніж вибирати місце для дослідження, необхідно переконатися, що там проводять необхідну діагностику.
Більшість з тих захворювань, які передаються статевим шляхом, можуть не виявляти себе протягом декількох місяців, тому відсутність симптомів не є гарантією того, що дівчина не заражена. Будучи носієм інфекції і не здогадуючись про хвороби, жінка може не тільки заразити партнера, але і втратити час для успішного лікування. Венеричні захворювання можуть приводити до безпліддя, запалення органів малого тазу та інших ускладнень.
Мазок ПЛР на інфекцію жінці призначається в тому випадку, якщо мав місце контакт з малознайомим партнером. Якщо венеричний статус останнього невідомий, значить, є ризик інфікування. Здача мазка на ПЛР доцільна у випадку, якщо:
- жінка сумнівається в «чистоті» свого нового партнера, так як під час статевого акту не використовувався презерватив;
- протягом року у жінки було декілька статевих партнерів;
- у пацієнтки раніше було виявлено венеричне захворювання;
- настала вагітність.
Обстеження на статеві інфекції є обов’язковим для майбутніх матерів, оскільки деякі з них, навіть якщо протікають приховано і не дають про себе знати, можуть нести серйозну небезпеку для життя і здоров’я плода.
Процедура взяття мазка
Зішкріб у жінок бере лікар-гінеколог. Сама процедура взяття мазка на полімеразну ланцюгову реакцію нічим не відрізняється від звичайного гінекологічного дослідження на вагінальну флору. Процедура взяття мазка ПЛР на хламідії, трихомоніаз, вірус папіломи людини, гонорею та інші статеві інфекції відбувається за стандартною схемою:
Процедура взяття зіскрібка зазвичай безболісна, але іноді пацієнтки відчувають неприємні відчуття з-за контакту чутливою слизовою з гінекологічними інструментами. Біль у процесі забору біоматеріалу може свідчити про перебіг запальному процесі.
Підготовка жінок до здачі мазка
- Вступати в інтимний зв’язок перед процедурою не можна – після останнього контакту повинно пройти не менше двох діб.
- Якщо жінка проходить лікування антибіотиками або застосовує вагінальні супозиторії, за три тижні до взяття мазка ПЛР курс терапії необхідно завершити. В іншому випадку результат аналізу може виявитися помилковим.
- Під час менструації мазок не беруть.
- Безпосередньо перед забором біоматеріалу не можна спринцюватися або використовувати антибактеріальне мило.
- Перед процедурою не можна відвідувати туалет, останній раз помочитися можна за три години до процедури.
Особливості підготовки і проведення процедури у чоловіків
Як вже було сказано, мазок ПЛР у чоловіків беруть з сечовипускального каналу. Щоб отримати необхідний біоматеріал, лікар-уролог використовує спеціальний тонкий зонд і запроваджує його на глибину 3-4 див Процес взяття мазка ПЛР на уреаплазму, гонорею та інші поширені збудники може принести біль і значний дискомфорт. Але доведеться потерпіти. Нерідко у чоловіків мазок на ПЛР викликає печіння і свербіж, тому перед введенням зонда з метою зменшити дискомфортні відчуття пацієнтам рекомендують масажувати уретру. Поетапно процедура взяття зіскрібка виглядає так:
- Чоловік звільняє статеві органи від одягу.
- Перш ніж вводити зонд в уретру, лікар одягає рукавички одноразові і здійснює візуальний огляд шкірних покривів, слизових оболонок на предмет висипань.
- Потім за допомогою інструменту уролог бере мазок методом ПЛР з сечовипускального каналу. Зонд вводиться на 3-4 см в глибину уретри і кілька разів прокручується.
- Після виймання зонда лікар робить мазок на предметному склі, яке згодом і відправить в лабораторію.
Крім хворобливих відчуттів, процедура взяття зіскрібка викликає у чоловіків психологічний дискомфорт. У тих, хто відвідує уролога регулярно, подібних проблем не виникає. Крім того, має значення правильна підготовка до мазком ПЛР. Вона полягає в дотриманні наступних умов:
- За кілька днів до аналізу чоловікові потрібно відмовитися від інтимних зв’язків.
- Мазок беруть в ранкові години.
- Перед процедурою чоловікові не потрібно проводити гігієну статевих органів, найкраще прийняти душ з вечора.
- За три години до взяття зразка біоматеріалу не можна відвідувати туалет.
Так само, як і у жінок, сильнодіючі препарати можуть спотворити результат аналізу на полімеразну ланцюгову реакцію.
Як розшифровуються аналізи на ПЛР
В принципі для того, щоб розібратися в результатах лабораторного дослідження на полімеразну ланцюгову реакцію, не потрібно володіти медичною освітою. Розшифрувати висновок експертів досить просто. У відповідях, які пацієнтові видають на руки, міститься інформація про тип інфекції. Якщо збудник виявлений, у висновку буде відзначений позитивний результат. Він свідчить про наявність в організмі досліджуваного людини ДНК або РНК вірусу.
Для ефективного лікування деяких захворювань необхідно мати точні дані про кількісну навантаженні, яка означає присутність РНК-копій збудника на 1 мл крові. Більшою мірою визначення кількісної навантаження важливо при хворобах, спровокованих умовно-патогенною мікрофлорою, оскільки інфекційні агенти активізуються і негативно впливають на організм людини тільки в тому випадку, якщо їх кількість перевищує встановлені пороги. Такий аналіз ПЛР має особливе значення для складання плану лікування і спостереженням за динамікою пацієнтів, інфікованих вірусним гепатитом або ВІЛ-інфекцією.
Як довго чекати відповідь
Дослідження на ПЛР відрізняються максимальною точністю, специфічністю і чутливістю. Мазок на полімеразну ланцюгову реакцію дозволяє дізнатися, чи є в організмі обстежуваного конкретний тип інфекції, визначити її штам і кількість РНК-копій. Метод ПЛР дозволяє виявляти збудника навіть при мінімальному вмісті ДНК вірусу в представлених зразках біоматеріалу.
Терміни виконання аналізу багато в чому залежать від того, який з існуючих методів полімеразної ланцюгової реакції застосовується в конкретній лабораторії. Найпростішим способом вивчення біологічного матеріалу вважається мікроскопічний. Зазвичай цей метод дослідження не займає багато часу. За терміновість пацієнтам доводиться платити додатково, але якщо з якихось причин є необхідність у проведенні екстреного дослідження, результати можуть видати пацієнту на руки через годину. Швидше всього відповіді аналізів отримують ті, хто звертається в спеціалізовані медустанови, оснащені власною лабораторією. Інакше необхідно враховувати час, який буде витрачено на доставку біоматеріалу.
Ціни на мазок ПЛР у Москві
Кінцева вартість аналізу буде залежати від того, на яку інфекцію необхідно перевірити пацієнта. У Москві на лабораторні дослідження методом ПЛР встановлено такі ціни:
- захворювання, що передаються статевим шляхом – аналіз виконується в середньому за 1-2 дні, вартість становить 300-500 руб. (за виявлення одного збудника);
- такі ж терміни і ціни встановлені на діагностику методом ПЛР вірусу Епштейна-Барра, папіломи людини, герпесу, цитомегаловірусної інфекції;
- обстеження на гепатит A, B, C, D, G обійдеться пацієнту в 650-800 руб., за уточнення кількісної навантаження доведеться заплатити ще 2000 руб. (на виконання дослідження знадобиться 4-5 днів);
- підтвердження наявності в шлунковому або кишковому біоптаті бактерії Хелікобактер пілорі (Helicobacter pylori) – 400-600 руб.;
- антитіла і антигени ВІЛ— 400-500 руб.;
- кількість РНК ВІЛ в зразках крові – понад 10 тис. руб.
З метою економії лікарі рекомендують вибирати пакети аналізів – такі дослідження обходяться дешевше. Послуги зі знижками надаються у більшості мережевих клінік, де роблять аналізи за методом ПЛР («СМ-Клініка», «Інвітро», «ВІН-Клінік») і багатопрофільних медцентрах.
Якщо в мазку виявилися патогенні збудники, не потрібно впадати у відчай. Головне – це як можна швидше почати терапію. Сьогодні існує чимало препаратів, завдяки яким навіть пацієнти з невиліковними хворобами мають всі шанси на високу якість та нормальну тривалість життя. Вибір тактики лікування повинен здійснювати лікар. Самолікування при інфекційних захворюваннях неприпустимо.
