Дослідження мазків крові — це досить поширений метод, що дозволяє швидко діагностувати багато часто зустрічаються порушення. Основними умовами ефективного використання цього методу діагностики є суворе дотримання техніки підготовки мазка і систематичне дослідження з дотриманням алгоритму.
На практиці далеко не завжди вдається в рамках використання гематологічної швидкої діагностики отримувати об’єктивні дані. Дослідження мазка крові дає можливість відносно швидко уточнювати і доповнювати отриману інформацію. Ця методика дозволяє виявляти деякі елементи, не виявляються при проведенні клінічних автоматизованих досліджень, наприклад, зміна еритроцитної форми поряд із зсувом лейкоцитарного показника вліво, тобто в бік незрілого нейтрофіла, або наявність паразитів. У деяких ситуаціях ця техніка дозволяє поставити остаточний діагноз.
Алгоритм дослідження
Він наступний:
- Безпосередньо після забору матеріалу кров необхідно швидко поміщати в пробірку з антикоагулянтом, щоб зберегти якість клітин.
- Забарвлення метиленовим синім дає можливість ідентифікувати ретикулоцити.
- Оцінка здійснюється на тонкому шарі мазка зі зчитуванням на рівні його кісок під мікроскопом.
- Під проведенням систематичного дослідження мазка крові передбачають алгоритм APEL.
Для чого використовують цей аналіз?
Для таких цілей:
- В рамках визначення порушень форми і розміру, а також змін кількості еритроцитів, тромбоцитів, лейкоцитів і різних типів кров’яних елементів (включаючи будь-які незрілі форми) поряд з їх процентним співвідношенням.
- Для діагностики різних захворювань, пов’язаних з порушеннями освіти, функцій або з надлишковим руйнуванням форменого елемента.
- Для того, щоб відстежувати формування клітин зі ступенем їх зрілості при лейкозі, після променевого лікування, а також в рамках порушення утворення гемоглобіну.
Коли призначають дане дослідження?
У тому випадку, якщо за результатом спільного аналізу та лейкоцитарної формули (що призначається за найбільш широкому колу показань), виявляється значне підвищення кількості лейкоцитів, атипових або незрілих клітин, тоді необхідно зробити мазок крові. Крім іншого подібне дослідження важливо здійснювати в ряді таких ситуацій:
- На тлі підозри на захворювання, яке впливає на клітини.
- При вживанні ліків, здатних вплинути на їх виробництво.
В рамках проведення аналізу мазка крові медики, як правило, застосовують венозну або ж капілярну біологічну рідину.
Підготовка
При заборі біоматеріалу з середнім діаметром розширення вени кров надходити повинна швидко в пробірку, яка містить антикоагулянт. Часто використовують этилендиаминтетраацетат, тому що він дає можливість краще зберігати досліджуваний формений елемент. Правда, для запобігання різного роду морфологічних деградаций клітин часовий проміжок між взяттям свіжого і добре гомогенізованого біоматеріалу та виготовленням препарату має бути, наскільки це можливо, коротким.
Підготовка мазків починається з паркану краплі крові (як правило, лише однією з капілярної трубки) на краєчок предметного скла для мікроскопа. Потім її розмазують допомогою другого скляного елемента, що ковзає по першому. Добре підготовлений мазок володіє в кінці так званим «мовою кішки», вказує на те, що зразок був виконаний коректно і дає можливість провести обстеження якісно.
Забарвлення
Забарвлення проводиться стандартним методом. Перед цією процедурою виготовлений мазок крові висушуються на повітрі допомогою похитування предметного скла, що дає можливість уникати формування нефарбованої світлої зони в центрі еритроцитів. Завдяки цьому виключається помилкова інтерпретація гипохромии.
Можуть бути і інші артефакти забарвлення. Наприклад, фарбування по Райту надає преципітат. Подібне відбувається тоді, коли фарбу через якийсь період не оновили, предметне скло тривалий час перебувало в окрашивающем розчині або погано було відмито. В результаті накопичення барвника можна інтерпретувати як наявність у крові паразитів і бактерій. Крім цього, фарбування мазка з морфологією клітин може бути змінено в рамках контакту предметного скла з парою формаліну. Зазвичай фарбуються зразки за методом Романовського на основі метиленового синього та еозину.
Класична забарвлення мазків крові, як правило, значно відрізняється від швидкої. В останні час подібні методики мають свої переваги, так як вони є стійкими до варіацій кислотності розчинів та формування депо речовини. Але, тим не менш, вони є менш ефективними в цілях виявлення полихроматофилов і погано змінюють колір гранул базофілів і мастоцитів.
Для того щоб отримати візуальну специфічну картину ретикулоцитів, потрібно провести фарбування з новим метиленовим синім. У пластикових пробірках кров’яну краплю перемішують з двома елементами NBM. Пробірка залишають при кімнатній температурі на десять хвилин. Маленька крапля після перемішування поміщають на предметне скло і розмазується точно так само, як під час виконання мазка. Потім предметне скло швидко висушується на повітрі і досліджується під мікроскопом з величезним збільшенням.
Систематичне дослідження
В рамках оцінки вкрай важливо керуватися єдиною схемою досліджень. Мікроскопія мазка крові, який виконаний одним тонким шаром за округлістю на кінчику, потовщується до свого основи. Клітини оцінюються на тонкому малюнку, так як товстий несе в собі мало відомостей. При малому збільшенні крайова частина мазка, переважно його округлий кінець, зазвичай обстежується на виявлення агрегату тромбоцитів або атипових широких клітин (лифмобласты або дендритні елементи).
Шар може мати форму зигзагів або кіски, що дозволяє досить чітко спостерігати різні кров’яні клітини в рамках спрямованого дослідження за алгоритмом APEL, де A передбачає інші атипові елементи з паразитами, Р позначає тромбоцити, Е говорить про еритроцитах, а L про лейкоцитах.
Дослідження мазків крові є досить поширеною методикою, що дозволяє швидко продіагностувати часто зустрічаються різні порушення. Головними умовами ефективного застосування цього методу виступає суворе дотримання техніки дослідження мазка із систематичним аналізом з дотриманням алгоритму процедури.
Що означають результати?
Зміна в мазку крові далеко не завжди дає можливість виставити діагноз. Зазвичай таке вказує на наявність певного захворювання, що передбачає подальше обстеження з метою встановлення точного діагнозу.
Доцільність проведення аналізу
Є достатньо велике коло захворювань, а разом з тим і розладів, на тлі яких можуть змінюватися властивості клітин, які циркулюють в кров’яному руслі. У нормі В біоматеріал з кісткового мозку проникають тільки зрілі елементи, але при низці патологій, наприклад при лейкозі, у нього можуть потрапляти незрілі аналоги у вигляді бластів. При деяких хворобливих станах, наприклад, при масивних інфекціях, в лейкоцитах можуть з’являтися характерні домішки, самі клітини стають атиповими, як, наприклад, при інфекційних мононуклеозах.
При дефіциті заліза або вітаміну B12, при вродженому порушення синтезу гемоглобіну можуть бути змінені властивості і зовнішній вигляд еритроцитів. Виявлення в мазку подібних патологічних клітин у надмірній кількості дає можливість запідозрити викликала їх патологію і призначити додаткове обстеження пацієнта. Мазок крові регулярно може призначатися людям з онкологічними захворюваннями кісткового мозку або лімфовузлів в рамках спостереження за динамікою та контролю за ефективністю терапії.