Переваги і недоліки

До переваг проточною цитофлуориметрии відносяться наступні:

• висока швидкість обробки (реєстрація до 30 тисяч подій за 1 секунду);
• можливість дослідження великого числа клітин (до 100 млн. в зразку);
• кількісна оцінка інтенсивності флуоресцентного випромінювання;
• аналіз кожної з клітин;
• одночасне дослідження різнорідних процесів;
• автоматичне розділення даних по популяції клітин;
• якісна візуалізація результатів.

Ще однією особливістю цієї технології є те, що анализируемую частку допускається фарбувати кількома флуоресцентними розчинами. Завдяки цьому відбувається многопараметрическое дослідження.

До недоліків можна віднести складність технічного обладнання і необхідність спеціальної підготовки проби.

Цитометры

Перші пристрої такого типу з’явилися вже в 1968 році в Німеччині, але широкого розповсюдження вони отримали набагато пізніше. В даний час всі прилади, що працюють за методом проточної цитофлуориметрии, можна розділити на 2 типи:

• пристрої, що вимірюють флуоресцентне випромінювання (дві і більше довжини хвилі), розсіяння світла під кутом 10 і 90° (детектор малокутового і бічного розсіювання);
• апарати, які, крім вимірювання декількох клітинних параметрів, що автоматично виробляють сортування на групи у відповідності з цими критеріями.

Детектор прямого світлорозсіювання призначений для визначення розмірів клітини, а пристрій для реєстрації бічного світлорозсіювання дозволяє отримати інформацію про наявність внутрішньоклітинних гранул, об’ємного співвідношення цитоплазми і ядра.

Класичні цитометры, на відміну від світлових мікроскопів, не дозволяють отримати зображення клітини. Однак в останні роки розроблені комбіновані пристрої, які здатні поєднувати можливості мікроскопа і цитофлуориметра. Мова про них піде нижче.