Аффинная хроматографія в медицині: особливості та застосування

Адсорбенти

В якості адсорбентів застосовують такі речовини:

  • Гелевидні склади на основі агарози – полісахариду, одержуваного з агару. Найбільш часто використовують 3 різновиди: сефарозу 4, CL (зшита агароза) і аффи-гель. Останній склад являє собою модифікований гель з агарози та поліакриламіду. Він володіє більшою біологічною інертністю, високою хімічною і термічною стійкістю.
  • Кремнезем (силікагель).
  • Скло.
  • Органічні полімери.

Для усунення механічних перешкод при контакті ліганду застосовують додаткові речовини, що відокремлюють його від носія (пептиди, диамины, поліаміни, олігосахариди).

Апаратура

Обладнання для афінної хроматографії включає в свій склад наступні основні вузли:

  • ємкості-накопичувачі для рухомої фази (елюентів);
  • насоси високого тиску для подачі середовища (найчастіше поршневі);
  • фільтр для очищення елюентів від пилу;
  • дозуючий пристрій;
  • хроматографічний колона для розділення суміші;
  • детектор для визначення розділених компонентів, що виходять з колони;
  • реєстратори хроматограмм і мікропроцесорний блок (ЕОМ).
Дивіться також:  Шкала Бартела: опис, особливості та застосування

З метою зменшення кількості розчиненого повітря через рухливу фазу попередньо пропускають гелій. Для зміни концентрації елюентів встановлюють кілька насосів, керованих програматором. Хроматографічні колони виготовляються з нержавіючої сталі (при підвищених вимогах до корозійної стійкості), скла (універсальний варіант) або з акрилу. Для препаративних цілей їх діаметр може коливатися від 2 до 70 див. В аналітичній хроматографії застосовують микроколонки Ø10-150 мкм.

Для підвищення чутливості детекторів в суміш вводяться реагенти, які сприяють утворенню речовин, які більше поглинають промені в ультрафіолетовій або видимій області спектра.