Рекомбінантна ДНК: опис, характеристики

Клонування

В стандартних протоколах клонування включає сім етапів.

Вибір організму-господаря і вектора клонування.

Одержання ДНК-вектора.

Формування клонируемой ДНК.

Створення рекомбінантної ДНК.

Введення її в організм господаря.

Відбір організмів, що її містять.

Вибір клонів з бажаними вставками ДНК і біологічними властивостями.

Після трансплантації в організм господаря чужорідні молекули, що містяться в рекомбінантної конструкції, можуть экспрессироваться або неэкспрессироваться. Експресія вимагає реструктуризації гена для включення послідовностей, які необхідні для продукування ДНК. Вона використовується трансляційний апаратом господаря.

Як працює

Рекомбінантна ДНК працює, коли клітина-господар экспрессирует білок з рекомбінантних генів. Експресія залежить від оточення гена набором сигналів, які забезпечують інструкції для його транскрипції. Вони включають в себе промотор, зв’язування рибосоми і термінатор.

Дивіться також: Різко захворів низ живота: причини, опис симптомів, можливі діагнози і лікування

Проблеми виникають, якщо ген містить интроны або сигнали, які діють як термінатори для бактеріального господаря. Це призводить до передчасного припинення. Рекомбінантний білок може бути неправильно оброблений, згорнуть або підданий розкладанню. Його виробництво в эукариотических системах зазвичай відбувається в дріжджах і нитчастих грибах. Використання тварин клітин утруднене із-за того, що багатьом потрібна міцна опорна поверхня.

Сторінка: 1 2 3 4 5